細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力
細(xì)胞計(jì)數(shù)是一種標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室方法,常用于從生命科學(xué)到醫(yī)學(xué)診斷的許多實(shí)驗(yàn)工作流程中。將細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)估與細(xì)胞活力相結(jié)合是表征細(xì)胞健康狀況的重要步驟。細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力信息可用于監(jiān)測(cè)增殖率、優(yōu)化生長(zhǎng)條件和歸一化細(xì)胞數(shù)據(jù)以供進(jìn)一步研究。
為獲得最佳結(jié)果,準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力測(cè)量至關(guān)重要。測(cè)量細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力的傳統(tǒng)方法通常通量低,缺乏線性,并且操作過程耗時(shí),無法提供滿足活細(xì)胞分析重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度所需的足夠的事件采樣。
iQue? 細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析試劑盒可在 96 孔和 384 孔板中在寬線性范圍內(nèi)獲得高準(zhǔn)確度,并通過從細(xì)胞標(biāo)記到分析的簡(jiǎn)化工作流程(無需細(xì)胞稀釋),對(duì)來自各種非貼壁細(xì)胞系的絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力數(shù)據(jù)進(jìn)行可重現(xiàn)的分析。利用 iQue? 高通量流式細(xì)胞儀高效準(zhǔn)確地定量細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力。
檢測(cè)原理
iQue? 細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析試劑盒檢測(cè)原理
該測(cè)定試劑盒專為定量分析細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力而設(shè)計(jì),其經(jīng)過優(yōu)化,可在采用 BR 和 VBR 配置的 iQue? 平臺(tái)上運(yùn)行,并且與高通量采樣和流式細(xì)胞儀檢測(cè)功能相結(jié)合。其利用從細(xì)胞標(biāo)記到分析的簡(jiǎn)化的工作流程,能夠在寬線性范圍內(nèi)對(duì)各種非貼壁細(xì)胞系的絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力進(jìn)行快速分析。
該試劑盒中包含經(jīng)驗(yàn)證的試劑和預(yù)置模板,用于設(shè)門策略和分析。其使用客戶提供的細(xì)胞,在快速、無需洗滌的分析中鑒別活細(xì)胞并測(cè)定樣品密度。
基本的分析工作流程:
- 將未稀釋的細(xì)胞與細(xì)胞活力染料以 1:1 的比例混合并孵育 10-30 分鐘
- 將計(jì)數(shù)微珠加入孔中
- 在 iQue? 平臺(tái)(采用 BR 和 VBR 配置)上對(duì)樣品板進(jìn)行分析
關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
提高生物學(xué)工作流程的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性
通過對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力的多重評(píng)估,確保獲得穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖 1.在較寬范圍內(nèi)進(jìn)行可重現(xiàn)和準(zhǔn)確的細(xì)胞活力評(píng)估和細(xì)胞計(jì)數(shù)
(A) 對(duì)各種比率的生長(zhǎng)細(xì)胞與熱滅活細(xì)胞(Jurkat、Raji 或 Ramos 細(xì)胞系)的混合物進(jìn)行測(cè)試,以確保整個(gè)靈敏度范圍內(nèi)的線性相關(guān)性。
(B) 比較不同密度的 Jurkat 細(xì)胞以確定細(xì)胞計(jì)數(shù)的線性范圍。可靠地測(cè)量密度范圍為 8 × 104 個(gè)細(xì)胞/mL 至 2 × 107 個(gè)細(xì)胞/mL 的未稀釋的細(xì)胞。
圖 2.利用熱圖和透視圖得到可操作的數(shù)據(jù)
通過將有限稀釋的 CHO-S 細(xì)胞接種到 96 孔板中來進(jìn)行有限稀釋克隆。將細(xì)胞置于定軌搖床上,在 37 ℃ 和 5% 濕度下培養(yǎng)。外孔僅含培養(yǎng)基,以免產(chǎn)生邊緣效應(yīng)。使用 iQue? 細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析試劑盒測(cè)定細(xì)胞密度和細(xì)胞活力。生成 Profile Map,以突出顯示滿足多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn) [(細(xì)胞密度 > 30 萬個(gè)細(xì)胞/mL)且(細(xì)胞活力 > 75%)] 的孔??赏ㄟ^拖動(dòng)圖表頂部的滑塊或右鍵單擊編輯來調(diào)整 Profile Map 中的各項(xiàng)指標(biāo),“匹配”圖將自動(dòng)更新。匹配結(jié)果可導(dǎo)出為 CSV 文件,用于選擇匹配結(jié)果或其他下游分析。
(A) 細(xì)胞密度熱圖
(B) 細(xì)胞活力熱圖
(C) 顯示與較高密度和活力結(jié)果匹配的 Profile Map
訂購(gòu)信息
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平臺(tái):與 iQue? 3/iQue? Screener Plus - VBR 和 BR 配置兼容
iQue? 細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析試劑盒 | 1 × 96 孔 | BA-97110 |
5 × 96 孔 | BA-97111 | |
1 × 384 孔? ? | BA-97112 | |
5 × 384 孔? ?? | BA-97113 |