在生理相關(guān)的模型中評(píng)估 T 細(xì)胞殺傷

圖 2.CD3×CD19 雙特異性 T 細(xì)胞單鏈抗體 (BiTE) 在 6 天內(nèi)可導(dǎo)致濃度依賴性的細(xì)胞殺傷、標(biāo)志物表達(dá)和細(xì)胞因子釋放。

將帶有 Incucyte^? Nuclight 綠色標(biāo)記的 Ramos 細(xì)胞（15 K/孔）與 PBMCs（75 K/孔）接種到孔板中，進(jìn)行共培養(yǎng)。使用 CD3×CD19 BiTE 抗體誘導(dǎo)活化。將細(xì)胞破碎，然后用 iQue^? 人 T 細(xì)胞殺傷分析試劑盒分析細(xì)胞和上清液。(A) 靶細(xì)胞的活力在 6 天中呈濃度依賴性降低。(B) T 細(xì)胞活化標(biāo)志物和 (C) 耗竭標(biāo)志物在 CD8+ 細(xì)胞上的表達(dá)上升，至第 3 天，然后開(kāi)始降低。(D) 釋放的 IFNγ 和 (E) 顆粒酶 B 的濃度。

在細(xì)胞和微球混合分析中，同時(shí)測(cè)定標(biāo)志物的表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子

圖 3.應(yīng)用 Immunocult CD3/CD28/CD2 活化因子誘導(dǎo) T 細(xì)胞活化、耗竭和殺傷標(biāo)志物的濃度和時(shí)間依賴性變化。

將帶有 Incucyte^? Nuclight 綠色標(biāo)記的 Ramos 細(xì)胞（15 K/孔）與 PBMCs（75 K/孔）接種到孔板中，進(jìn)行共培養(yǎng)。使用 Immunocult CD3/CD28/CD2 誘導(dǎo)活化，采用的最高濃度等同于建議的刺激濃度（25 μL 每 1e6 個(gè)細(xì)胞/mL）。將細(xì)胞破碎，然后用 iQue^? 人 T 細(xì)胞殺傷分析試劑盒分析細(xì)胞和上清液。(A) 晚期活化的 T 細(xì)胞 (CD25) 在 CD8+ 細(xì)胞上的表達(dá)。(B) T 細(xì)胞耗竭 (PD-1) 在 CD8+ 細(xì)胞上的表達(dá)。(C) 釋放的 IFNγ 和 (D) 顆粒酶 B 的濃度。

實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)分析和創(chuàng)新的可視化工具，支持快速生成定量讀數(shù)

圖 4.采用 iQue^? ForeCyt^? 上的預(yù)定義設(shè)門進(jìn)行 T 細(xì)胞亞群的自動(dòng)表型分析

將來(lái)自 3 個(gè)不同供體的 PBMCs（120 K/孔）與帶有 Incucyte^? Nuclight 綠色標(biāo)記的 Ramos 細(xì)胞（40 K/孔）共培養(yǎng)，并用數(shù)量遞增的 Dynabead CD3/CD28 進(jìn)行活化。在第 3 天，使用 iQue^? 人 T 細(xì)胞殺傷分析試劑盒進(jìn)行分析。(A) 重疊圖像展示了陽(yáng)性（4:1，Dynabead:PBMC）和陰性（無(wú) Dynabead）對(duì)照中 CD25 表達(dá)的差異。(B) 熱圖顯示了來(lái)自每個(gè)供體的 PBMC 上 CD25 的表達(dá)（響應(yīng) Dynabead）。在較低的 Dynabead 密度下，供體 2 形成表型的敏感性要強(qiáng)于供體 1 和供體 3。(C) 圖中將來(lái)自 (B) 圖的數(shù)據(jù)匯總為濃度響應(yīng)曲線。

將傳統(tǒng)工作流程壓縮為單個(gè)小型化的多重分析

圖 5.使用清晰易懂的方案，通過(guò) iQue^? 人 T 細(xì)胞殺傷分析試劑盒進(jìn)行 T 細(xì)胞表型和細(xì)胞因子釋放分析。

采用細(xì)胞和微球混合分析，采集單個(gè)孔中的細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)數(shù)據(jù)和上清液細(xì)胞因子的濃度數(shù)據(jù)。這一簡(jiǎn)化的工作流程不需要進(jìn)行額外的優(yōu)化或稀釋操作，僅需要一個(gè)清洗步驟，可助您盡可能縮短獲得結(jié)果的時(shí)間。