HSC子細(xì)胞分離或“雙細(xì)胞分離”
造血干細(xì)胞 (HSC) 在造血系統(tǒng)中占據(jù)頂端地位,負(fù)責(zé)建立和維持功能性血液系統(tǒng)。HSC 憑借其可自我更新以及可生成各種造血系統(tǒng)血細(xì)胞的特性發(fā)揮其獨(dú)特的作用。因此,自我更新和分化的平衡對(duì)于我們血液系統(tǒng)的健康功能而言至關(guān)重要。
然而,導(dǎo)致一種或另一種干細(xì)胞命運(yùn)的動(dòng)力學(xué)還尚未明確。CFC實(shí)驗(yàn)是研究命運(yùn)決策的備選方法之一(請(qǐng)參考?造血干細(xì)胞集落)。然而,CFC 試驗(yàn)只能研究單個(gè)干細(xì)胞或祖細(xì)胞的集落形成,無(wú)法區(qū)分這些集落內(nèi)的單細(xì)胞。因此,研究細(xì)胞命運(yùn)決策的另一個(gè)選擇是在分子和功能試驗(yàn)如單細(xì)胞測(cè)序或移植試驗(yàn)中,在單細(xì)胞水平上研究源于一個(gè)“母”HSC 的“子”細(xì)胞。
然而,這些方法都需要先分離單個(gè)“子”細(xì)胞(此處也稱為“Doublets 分裂”)。尤其是對(duì)于功能和表達(dá)實(shí)驗(yàn),必須在對(duì)細(xì)胞分子程序影響盡量小的條件下進(jìn)行造血干細(xì)胞分裂。通常通過(guò) FACS 從骨髓或血液樣本中分離 HSC細(xì)胞。然而,由于總體細(xì)胞數(shù)量較少(最多 2 個(gè)子細(xì)胞),無(wú)法通過(guò)此方法進(jìn)行 Doublets 分裂。過(guò)去,研究人員通過(guò)連續(xù)稀釋來(lái)進(jìn)行 Doublets 分裂,即將細(xì)胞從一個(gè)孔移液到另一個(gè)孔,直到得到單個(gè)細(xì)胞。然而,這種方法并不溫和,損傷風(fēng)險(xiǎn)高,甚至可能導(dǎo)致細(xì)胞松散。此外,雙細(xì)胞“難分難舍”的特性導(dǎo)致連續(xù)稀釋法的成功率較低。
我們現(xiàn)在為您提供一個(gè)更好的選擇,使您能夠溫和地分離子細(xì)胞并且確保每個(gè)單細(xì)胞可追溯。您可以使用 CellCelector 的交互式挑取模式來(lái)分裂雙細(xì)胞,同時(shí)可以通過(guò)實(shí)時(shí)圖像全面掌握細(xì)胞行為,避免丟失細(xì)胞。而且,CellCelector 挑取細(xì)胞的方式非常溫和,最大限度地減少了對(duì)細(xì)胞分子程序的影響。不僅如此,CellCelector 還可以嚴(yán)格記錄挑取流程,確保充分可追溯。
A:來(lái)自同一個(gè) HSC 的子細(xì)胞,紅色箭頭指向的是待分離的細(xì)胞。
C:在毛細(xì)管的吸引力下,細(xì)胞現(xiàn)在開(kāi)始向毛細(xì)管方向移動(dòng),最接近毛細(xì)管的細(xì)胞移動(dòng)最快(紅色箭頭)。
D:一旦細(xì)胞無(wú)法逃逸,將毛細(xì)管移至遠(yuǎn)離其他細(xì)胞的位置。
E:最終,被吸引的細(xì)胞與其他子細(xì)胞之間的距離變得足夠大,此時(shí)可以安全地進(jìn)行單細(xì)胞挑取。