使用高通量流式細(xì)胞儀檢測抗 SARS-CoV-2 IgG、IgM 和 IgA 抗體
通過多重高通量血清學(xué)檢測全面了解抗 SARS-CoV-2 抗體，推進(jìn) COVID-19 研究。
由于嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒 2 型 (SARS-CoV-2) 不斷發(fā)生變異和逃逸，因此將與人類長期共存。由于激發(fā)抵抗這種病毒的體液免疫應(yīng)答對于防護(hù)至關(guān)重要，因此目前需要準(zhǔn)確評估抗 SARS-CoV-2 抗體應(yīng)答的數(shù)量和持續(xù)時(shí)間，特別是靶向 SARS-CoV-2 刺突蛋白受體結(jié)合域 (RBD) 的抗體。SARS-CoV-2 刺突 RBD 通過與血管緊張素轉(zhuǎn)換酶 2 (ACE2) 結(jié)合介導(dǎo)病毒進(jìn)入人體細(xì)胞，它是目前多種常用 COVID-19 疫苗的主要靶點(diǎn)。抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD 抗體通常具有強(qiáng)大的病毒中和活性，并且與抵抗該病毒的保護(hù)性免疫相關(guān)。我們可以通過血清學(xué)檢測定量分析 SARS-CoV-2 刺突 RBD 的三種主要同型特異性抗體（IgG、IgM 和 IgA），幫助表征和監(jiān)測 COVID-19 患者和疫苗接種者體內(nèi)的抗體應(yīng)答持續(xù)時(shí)間，執(zhí)行無癥狀感染檢測并調(diào)查某個(gè)人群的既往感染率。
目前有多種方法可用于檢測抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD IgG、IgM 或 IgA 抗體，包括傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附測定 (ELISA)、側(cè)流免疫分析和流式細(xì)胞術(shù)。但是，這些方法存在以下局限性：
- 僅提供定性分析結(jié)果
- 靈敏度和特異性低
- 耗費(fèi)人力，可能不支持高通量應(yīng)用
- 不能對 IgG、IgM 和 IgA 抗體執(zhí)行多重分析
- 需要大量試劑
iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒提供了一種快速、可靠、靈敏的血清學(xué)檢測方法，可以在 96 或 384 孔板的單個(gè)孔中測定 IgG、IgM 和 IgA 抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD 抗體，抗體檢測水平低至 pg/mL。對所有三種同種型抗體進(jìn)行聯(lián)合檢測可以節(jié)省時(shí)間和寶貴的患者樣本，并能全面呈現(xiàn)自然感染 SARS-CoV-2 或接種 COVID-19 疫苗后體液免疫應(yīng)答隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化。借助 iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒加快研究！
應(yīng)用
檢測原理
iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒是一種基于微球的免疫分析試劑盒，能夠同時(shí)檢測人免疫系統(tǒng)針對病毒感染或接種疫苗產(chǎn)生的靶向 SARS-CoV-2 刺突蛋白 RBD 的 IgG、IgM 和 IgA 抗體。
iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒經(jīng)過了優(yōu)化，能夠在采用 VBR 配置的 iQue? 平臺上進(jìn)行穩(wěn)健的多重分析。通過簡化的工作流程和易于使用的預(yù)置模板對人血液樣本（血清和血漿）中抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD 抗體進(jìn)行定性和定量分析。
基本工作流程：
- 將預(yù)稀釋患者樣本添加到 96 或 384 孔板中
- 添加 SARS-CoV-2 RBD 偶聯(lián)微球，捕獲抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD 抗體
- 添加含有熒光標(biāo)記的抗人 IgG、IgM 和 IgA 抗體的 SARS-CoV-2 抗體檢測混合物
- 在 iQue? 平臺（采用 VBR 配置）上分析樣品板。
關(guān)鍵優(yōu)勢
準(zhǔn)確評估免疫應(yīng)答?-?同時(shí)靈敏地測定自然感染或接種疫苗誘導(dǎo)的抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD IgG、IgM 和 IgA 抗體。
最大程度地提高分析效率 ?-?多重分析支持在單個(gè)孔中對 SARS-CoV-2 刺突 RBD 的三種主要同種型特異性抗體（IgG、IgM 和 IgA）進(jìn)行高通量分析，從而全面分析體液免疫應(yīng)答。
節(jié)省寶貴樣品?-?通過精簡的工作流程節(jié)省寶貴樣品 - 只需要一份 10 μL 樣品（至少稀釋 100 倍）即可。
準(zhǔn)確評估免疫應(yīng)答
同時(shí)靈敏地測定自然感染或接種疫苗誘導(dǎo)的抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD IgG、IgM 和 IgA 抗體。
圖 1. 分析 COVID-19 康復(fù)患者 (P1-4)血清 (A) 中的抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD IgG、IgM 和 IgA 抗體。在疫情前收集的兩個(gè)個(gè)體的血清，作為陰性對照 (Neg. 1-2)。 (B) 分析兩個(gè)個(gè)體（VA&VB）在免疫前（VA-0、VB-0），以及接種第一劑（VA-1、VB-1）和第二劑（VA-2、VB-2）BNT162b2（輝瑞生物科技）COVID-19 疫苗后的血清。使用檢測稀釋液按 1:100 的比例稀釋血清樣品，然后按 1:6 的比例將其連續(xù)稀釋三次，以生成稀釋曲線。
最大程度地提高分析效率
多重分析支持在單個(gè)孔中對 SARS-CoV-2 刺突 RBD 的三種主要同種型特異性抗體（IgG、IgM 和 IgA）進(jìn)行高通量分析，從而通過實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)分析工具和創(chuàng)新可視化工具全面分析體液免疫應(yīng)答。
圖 2. 分析 COVID-19 康復(fù)患者或 BNT162b2（輝瑞生物科技）疫苗接種者血清中的抗 SARS-CoV-2 刺突 RBD IgG、IgM 和 IgA 抗體。使用檢測稀釋液按 1:100 的比例稀釋血清樣品，然后按 1:3 的比例將其連續(xù)稀釋三次。從兩個(gè) COVID-19 陰性個(gè)體收集的血清，作為陰性對照 (Neg. Ctl)。每種顏色表示三次稀釋曲線，在板的不同象限中重復(fù)存在。(A) 板布局 (B) 每孔抗 SARS-CoV-3 刺突 RBD IgG 抗體濃度 (ng/mL) 的熱圖。?
節(jié)省寶貴樣品
通過精簡的工作流程節(jié)省寶貴樣品。
圖 3：iQue? SARS-CoV-2（IgG、IgM 和 IgA）試劑盒工作流程。操作步驟易于遵守，需要的樣品很少（只需要一份 10 μL 的血漿/血清樣品，至少稀釋 100 倍）。
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