什么是吞噬作用？
吞噬作用是一種特殊形式的內(nèi)吞作用，細(xì)胞以這種方式吞噬和內(nèi)化固體物質(zhì)。巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和未成熟的樹突狀細(xì)胞是免疫系統(tǒng)的主要吞噬細(xì)胞，專門參與吞噬過程。吞噬作用是控制、殺傷和處理微生物以進(jìn)行抗原呈遞的重要機(jī)制，代表了病原體先天免疫應(yīng)答的一個(gè)重要方面。
應(yīng)用
Incucyte? 吞噬作用分析簡(jiǎn)介
簡(jiǎn)單的即混即讀式成像分析，可直接在培養(yǎng)箱內(nèi)對(duì)活細(xì)胞的吞噬作用進(jìn)行實(shí)時(shí)自動(dòng)定量分析。該分析采用 pH 敏感性偶聯(lián)探針，可對(duì)生物顆粒的內(nèi)化進(jìn)行實(shí)時(shí)的可視化和分析，非常適用于監(jiān)測(cè)免疫細(xì)胞對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌或酵母源性病原體的吞噬作用。
視頻：使用 Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)吞噬作用。使用 Incucyte? 活細(xì)胞成像和分析系統(tǒng)采集的延時(shí)視頻實(shí)時(shí)顯示了小鼠 J774A.1 型巨噬細(xì)胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的過程。pHrodo? Bioparticles? 在被吞噬并進(jìn)入吞噬體的酸性環(huán)境中后，熒光增加。Incucyte? 集成圖像分析工具能夠在整個(gè)分析過程中分析和測(cè)定綠色熒光信號(hào)，并將背景熒光的影響降至最低。注意巨噬細(xì)胞的動(dòng)態(tài)活動(dòng)，和隨著時(shí)間推移形成吞噬杯，進(jìn)行生物顆粒吞噬的過程。
檢測(cè)原理
- 將巨噬細(xì)胞（例如 J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞）或其他吞噬細(xì)胞接種到 96 或 384 孔板中。
- 添加即混即讀的無菌 Incucyte? pHrodo? Bioparticles? 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)吞噬作用。
- 細(xì)胞熒光增加表明 pHrodo? Bioparticles? 已內(nèi)化至吞噬體中。Incucyte? 自動(dòng)圖像分析可實(shí)現(xiàn)對(duì)隨時(shí)間變化的吞噬作用進(jìn)行定量分析。
關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
Incucyte? 吞噬作用分析的關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
- 使用延時(shí)成像技術(shù)驗(yàn)證吞噬作用
- 自動(dòng)分析和定量
- 即混即讀的 96/384 孔規(guī)格 - 無需執(zhí)行細(xì)胞固定、封閉或分離操作
- 高靈敏度、低背景、低細(xì)胞數(shù)
- Incucyte? 的無菌 pHrodo? Bioparticles? 可支持長(zhǎng)期的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)（0 到 > 48 小時(shí)）
使用延時(shí)成像技術(shù)驗(yàn)證吞噬作用
圖 1. J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的 4 小時(shí)延時(shí)可視化視頻。圖像中證明了細(xì)胞質(zhì)中存在熒光點(diǎn)狀（吞噬體）標(biāo)記的結(jié)構(gòu)，但細(xì)胞核中不存在該結(jié)構(gòu)。
自動(dòng)分析和定量
圖 2. 使用熒光分割進(jìn)行吞噬作用的定量分析。Incucyte? 軟件能夠準(zhǔn)確分割熒光圖像（桃紅色 mask），并將背景熒光的影響降至最低。
即混即讀的 96/384 孔規(guī)格 - 無需執(zhí)行細(xì)胞固定、封閉或分離操作
圖 3. Incucyte? 吞噬作用分析快速入門指南。
高靈敏度、低背景、低細(xì)胞數(shù)
響應(yīng)程度取決于細(xì)胞數(shù)量和 Bioparticles? 數(shù)量。
圖 4. 吞噬作用的定量取決于細(xì)胞數(shù)量和 Bioparticles?。J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色金黃葡萄球菌 Bioparticles?（96 孔規(guī)格）。注意每孔低至 3 K 細(xì)胞時(shí)的高信噪比。
圖 5. 在沒有細(xì)胞、Bioparticles? 或抑制劑（細(xì)胞松弛素 D）的情況下，產(chǎn)生高度一致的吞噬信號(hào)，且?guī)缀鯖]有背景信號(hào)。圖中顯示了 J774A.1 細(xì)胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的時(shí)程孔板視圖。
圖 6.細(xì)胞松弛素 D、拉春庫(kù)林 A、諾考達(dá)唑抑制吞噬作用。圖中顯示了 J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞在添加抑制劑的情況下吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的結(jié)果。
Incucyte? 吞噬作用分析 vs. 其他常見方法
評(píng)估吞噬作用的常用方法通常為單點(diǎn)分析（例如高內(nèi)涵分析 (HCA)），需要細(xì)胞分離（例如流式細(xì)胞儀）或清洗/淬滅標(biāo)記病原體（例如熒光素標(biāo)記）。
Incucyte? 活細(xì)胞分析 | 酶標(biāo)儀 | 流式細(xì)胞儀? ? | HCA | ELISA | |
|---|---|---|---|---|---|
實(shí)時(shí)細(xì)胞可視化 | ? | ||||
集成分析 | ? | ? | ? | ||
即混即讀，無需清洗或淬滅操作? | ? | ||||
長(zhǎng)期動(dòng)力學(xué)測(cè)定 | ? | ||||
靈活選擇效應(yīng)細(xì)胞?? | ? | ? | ? | ? | ? |
無需細(xì)胞固定/分離 | ? | ? | |||
高靈敏度/低背景信號(hào) | ? | ? | ? | ||
低細(xì)胞數(shù)/生物顆粒數(shù)量? ?? | ? | ? | ? |
訂購(gòu)信息
訂購(gòu)信息
Incucyte? pHrodo? Bioparticles? 經(jīng)充分驗(yàn)證，可用于 Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)，并經(jīng)過滅菌處理，可進(jìn)行吞噬作用的長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)（0 至 >48 小時(shí)）。
產(chǎn)品 | 產(chǎn)品數(shù)據(jù)表 | 安全性數(shù)據(jù)表? ? ? | 數(shù)量 | 產(chǎn)品目錄號(hào) |
|---|---|---|---|---|
Incucyte? pHrodo? 紅色大腸桿菌 Bioparticles? | 2 mg | 4615 | ||
Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4616 | |
Incucyte? pHrodo? 紅色酵母聚糖 Bioparticles? | 查看 | 1 mg | 4617 | |
Incucyte? pHrodo? 綠色酵母聚糖 Bioparticles? | 查看 | 1 mg | 4618 | |
Incucyte? pHrodo? 紅色金黃葡萄球菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4619 | |
Incucyte? pHrodo? 綠色金黃葡萄球菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4620 |
資源
文獻(xiàn)和文檔
相關(guān)應(yīng)用
相關(guān)文獻(xiàn)
一種用于定量巨噬細(xì)胞吞噬作用的全新實(shí)時(shí)成像平臺(tái)
Researchers at The University of Oxford use Incucyte? live-cell analysis system to quantify phagocytosis with?牛津大學(xué)的研究人員使用 Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)定量分析吞噬作用，實(shí)現(xiàn)了比現(xiàn)有方法更高的準(zhǔn)確度和靈敏度。即使細(xì)胞數(shù)量稀少或有限，Incucyte? 也能夠支持原代吞噬細(xì)胞的詳細(xì)體外研究。Kapellos TS, Taylor L, Lee H, Cowley SA, James WS, Iqbal AJ, Greaves DR doi: 10.1016/j.bcp.2016.07.011
