圖 1. 監(jiān)測腫瘤球大小隨時間的變化，監(jiān)測時，腫瘤球的生長在組織培養(yǎng)箱內(nèi)不受干擾。

明場圖像顯示了 MDA-MB-231 乳腺癌腫瘤球 ± 細胞毒素劑喜樹堿 (1 μM) 的生長情況。 經(jīng)溶媒處理的腫瘤球體積增加，而經(jīng) CMP 處理的腫瘤球保持原有的密度。 每 6 h 自動采集一次圖像，用于明場區(qū)域的定量分析。

圖 2. 高質(zhì)量 HD 相位圖和 DF 明場圖像顯示腫瘤球形態(tài)。A549 和 MDA-MB-231 細胞接種后 72 小時形成的腫瘤球高質(zhì)量 HD 相位圖和對應的 DF 明場圖像。從圖中可輕松地區(qū)分疏松的聚集體和致密的腫瘤球形態(tài)，如圖中 A549 和 MDA-MB-231 細胞所示例。MDA-MB-231 聚集物在離心后加入 2.5% v/v Matrigel^?，可密集化形成腫瘤球。所有圖像經(jīng) 10 倍放大后采集。

揭示單一培養(yǎng)或共培養(yǎng)中細胞隨時間的變化

圖 3.確定細胞毒性和細胞抑制的作用機制。 利用 Incucyte^? Cytotox 綠色染料比較明場和熒光讀數(shù)。圖像中顯示了處理 10 天后，SK-OV-3 腫瘤球明場 mask 區(qū)域中的綠色熒光。 明場區(qū)域的時程曲線顯示了兩種藥物處理后類似的響應 - 隨著藥物濃度的增加，腫瘤球的生長受到抑制。 明場邊界內(nèi)的平均綠色強度（底部行）顯示了腫瘤球?qū)毎拘裕ㄏ矘鋲A，左）和細胞抑制性（環(huán)己酰亞胺）試劑的響應差異。 在喜樹堿存在的情況下，細胞死亡，導致細胞毒性報告試劑（Incucyte^? Cytotox 綠色染料）產(chǎn)生的熒光強度增加；而經(jīng)環(huán)己酰亞胺和溶媒處理的腫瘤球只顯示出少量細胞死亡，與預期一致。

圖 4. 在 Incucyte^? 活細胞分析系統(tǒng)中持續(xù)監(jiān)測腫瘤球的生長和細胞健康狀態(tài)。SK-OV-3 人卵巢癌細胞穩(wěn)定表達核限制性熒光蛋白（Incucyte^? Nuclight 紅色慢病毒試劑）。細胞毒性藥物喜樹堿 (1 μM) 抑制了熒光隨時間的增加（在明場 mask 定義的腫瘤球區(qū)域內(nèi)測定）。

圖 5.（視頻）.在 3D 細胞培養(yǎng)模型中定量分析抗體依賴性細胞介導的細胞毒性 (ADCC)。在腫瘤球模型中，曲妥珠單抗（Herceptin^?，赫賽汀^?）誘導 SK-OV-3 卵巢癌細胞的免疫細胞殺傷。將帶有 Incucyte^? Nuclight 紅色標記的 HER2 陽性 SKOV-3 腫瘤球與 PBMC 共同接種，并使用赫賽?。ò邢?HER2 受體的 mAb）處理。赫賽汀可誘導 SKOV-3 腫瘤球的生長抑制。

下載實驗方案

生成可重現(xiàn)的定量數(shù)據(jù)

圖 6.經(jīng)實驗室測試和驗證的 Incucyte^? 腫瘤球方案清晰易懂。減少 3D 細胞培養(yǎng)中解決難題的時間，無需反復實驗即可獲得適合定量分析的圖像。

下載實驗方案

圖 7. 腫瘤球培養(yǎng)顯示出分析的穩(wěn)定性和可重現(xiàn)性。Incucyte^? VesselView 展示了 4 個細胞密度下 3 種腫瘤球類型（肺癌、纖維肉瘤、卵巢癌）的明場區(qū)域 mask。明場區(qū)域圖顯示，這些細胞類型以建議的密度（2500 個細胞/孔）接種可產(chǎn)生穩(wěn)定的時程曲線。

圖 8.在生理相關(guān)條件下進行穩(wěn)定的藥理學分析。在組織培養(yǎng)箱中進行無標記腫瘤球分析，檢測喜樹堿 (CMP)、順鉑 (CIS) 和奧沙利鉑 (OXA) 對 SKOV-3 細胞生長的影響。SKOV-3 細胞以 5000 個細胞/孔的密度接種，等待腫瘤球形成（72 小時），然后采用一系列稀釋的化合物處理細胞，獲得腫瘤球生長的動力學參數(shù)。微孔板圖表展示了單個孔隨時間的最大明場 (BF) 面積 (μm2)。濃度響應曲線顯示了處理 240小時后的最大 BF 面積 (μm2)。數(shù)據(jù)收集時間為 240 小時，每間隔 6 小時采集一次圖像。每個數(shù)據(jù)點代表平均值 ± SEM，n = 8。

下載應用指南

圖 9. 向?qū)浇缑妫词钩醮问褂玫挠脩粢材軌蜉p松操作。 自動圖像采集和分析工具可為您帶來“輕松設(shè)置，自動化處理”的體驗。支持遠程查看圖像，監(jiān)測實驗進程，實時分析，快速作出決策。