賽多利斯高通量流式細胞儀
作為常規(guī)細胞分析工作流程的一部分,科學家使用流式細胞儀來研究復雜的生物學過程。這類研究推動了抗體發(fā)現(xiàn)、T 細胞工程和免疫腫瘤學的進步,對社會產(chǎn)生了深遠影響。為了緊跟市場需求,科學家門亟需新的方法,以便在高通量研究工作流程中獲取生物學相關數(shù)據(jù)。
數(shù)十年來,流式細胞分選儀都采用不連續(xù)的采樣和數(shù)據(jù)分析工作流程,不僅效率低下,而且操作十分復雜,因此不適合高通量應用,賽多利斯意識了到更新這項技術的迫切需求。iQue??流式細胞儀能夠直觀且迅速從樣品中獲取生物學相關數(shù)據(jù),速度比市場上任何其他儀器都更快。此外,它還配備簡約易用的軟件。
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利用流式細胞儀進行高通量篩選 (HTS)
視頻:利用賽多利斯高通量流式細胞儀解決方案加速您的整個工作流程
iQue??能處理 96、384 或 1536 孔板,并可連接任意自動化系統(tǒng),實現(xiàn)連續(xù)孔板上樣。
利用流式細胞儀進行高通量篩選 (HTS) 的應用
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賽多利斯 iQue? 高通量流式細胞儀應用可在單個孔中對細胞表型和功能進行多重分析,從而解決復雜的細胞研究問題。
使用 iQue? 高通量流式細胞儀,同時分析多個生物學讀數(shù),生成相關且準確的數(shù)據(jù),快速收獲新的科學發(fā)現(xiàn)。??
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為什么要選擇賽多利斯高通量流式細胞儀解決方案?
- 提供經(jīng)過優(yōu)化的即混即讀試劑盒,且配有現(xiàn)成可用的分析模板
- 靈活的熒光選擇,提供至多 3 個激光激發(fā)通道和 13 個顏色發(fā)射通道
- 可在多用戶環(huán)境中實現(xiàn)可擴展、可靠且可重復的數(shù)據(jù)收集
- 增強型沖洗站,配備可報告卡盒液位的智能軟件
- 獨特的“氣泡間隔“采樣技術可在短短 5 分鐘內(nèi)處理分析完 96 孔板,在 20 分鐘內(nèi)處理分析完 384 孔板
- 自動板校準、QC、檢測器清潔和關機功能
- 一套軟件解決方案就能滿足您所有的數(shù)據(jù)采集和分析需求
- 快速數(shù)據(jù)可視化 - 調(diào)整設門,實時查看更新的全孔板分析
- 向?qū)街笜藙?chuàng)建、統(tǒng)計分析、可視化和報告功能
- 使用多種選擇標準輕松識別感興趣的板孔
- 比較、識別和排序?qū)嶒炛兴锌装迳系目?/li>
- 從實驗水平逐步深入到孔板水平、孔水平、細胞水平
案例研究:聽聽賽多利斯高通量流式細胞儀的用戶反饋
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常見問答
流式細胞儀通過懸浮細胞的顆粒大小、復雜性(也稱為粒度)和相對熒光強度相關信息來分析它們的物理特性。
在流式細胞儀中,流路系統(tǒng)負責將液流傳送至激光束處。細胞或顆粒將一個接一個地依次通過激光。在流式細胞儀的光學系統(tǒng)部分,激光束將照亮細胞/顆粒,并將散射光和熒光定向到適當?shù)臋z測器上。
流式細胞儀的電子系統(tǒng)會將這些光信號轉(zhuǎn)換成可以通過計算機處理的電子信號。一臺典型的流式細胞儀可以設置為每個樣品收集一定數(shù)量的事件。
任何尺寸在 0.2 至 150 微米范圍內(nèi)的懸浮顆?;蚣毎歼m合采用流式細胞儀分析。在分析之前,需要從組織樣本中分離出細胞。
為了收集更多的信息,可以用熒光分子標記細胞。具體來說,帶熒光標記的抗體可以與細胞表面的蛋白質(zhì)(抗原)結(jié)合。如果一個細胞有多個抗原,就會有許多帶熒光標記的抗體與之結(jié)合,產(chǎn)生強烈的熒光信號。無抗原或抗原很少的細胞會產(chǎn)生較弱的熒光信號。
熒光標記物(例如熒光團偶聯(lián)的抗體)可直接靶定目標表位,方便我們測量其生物學特性和生化特性。熒光標記的應用范圍非常廣泛,包括識別和定量獨立的細胞群、細胞表面受體或細胞內(nèi)靶標、細胞分選、免疫表型分析和細胞凋亡研究。
在流式細胞儀實驗中,每一個通過檢測點并被檢測到的細胞都會被視為一個獨立事件。儀器檢測到的每一種光(前向散射、側(cè)向散射和不同波長的熒光發(fā)射光)也都有自己的專用通道。
每個事件的數(shù)據(jù)都會獨立繪制成圖,代表每個事件在每個通道中檢測到的光信號強度。這些數(shù)據(jù)可通過多種不同的方式進行可視化呈現(xiàn)。流式細胞儀常用的數(shù)據(jù)圖表類型包括直方圖、點圖和輪廓線圖。
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直方圖
我們通常使用直方圖來比較兩個或多個細胞群的熒光強度。
散點圖
散點圖以散點的形式同時比較 2 個或 3 個參數(shù),其中每個事件都以一個點來表示。點圖這種圖形可以一次顯示多個變量之間的關系,所用參數(shù)可以是散射光和熒光信號的任意組合。
等高線圖
輪廓線圖顯示細胞群的相對頻率,與收集到的事件數(shù)量無關。輪廓線圖顯示的是概率輪廓,其中連接的線條代表數(shù)量相近的細胞。同心環(huán)在細胞群周圍形成,因此密度越高,輪廓線圖上的環(huán)就越近。
圖 1.流式細胞儀數(shù)據(jù)示例。(A) 將 Raji 細胞(用 iQue? 細胞增殖和編碼(紫色/藍色)染料進行明亮標記)、Ramos 細胞(用編碼染料進行暗淡標記)和 Jurkat 細胞(未標記)混合后(5K/孔)進行補體依賴的細胞毒性作用CDC 檢測,根據(jù)其編碼染料熒光強度進行分離,如直方圖所示。(B) 利用 iQue? Forecyt? 上的預先設門功能實施人 T 細胞亞群自動表型分析得到的散點圖示例。(C) 等高線圖,圖中顯示了 CD14 陽性細胞群的清晰圈門。
流式細胞儀是一種強大的工具,可應用于免疫學、分子生物學、細菌學、病毒學、癌癥生物學和傳染性疾病監(jiān)測。流式細胞儀的常見應用之一是免疫表型分析。這類應用借助流式細胞儀的特殊能力同時分析混合細胞群的多項參數(shù),如表面標記、細胞因子分析和細胞健康狀態(tài)。