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生物工藝的性能提升

膜層析法是對(duì)傳統(tǒng)色譜法的挑戰(zhàn)

一次性膜吸附器屬于即用型設(shè)備,可以顯著縮短動(dòng)手操作的時(shí)間,消除包裝故障,并且無需冷藏室存儲(chǔ)。風(fēng)險(xiǎn)和前期投資都獲得了有利的影響。與此同時(shí),它們提高了生物負(fù)載控制和生產(chǎn)力。

高通量

具有開孔結(jié)構(gòu)的膜設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)高流速。結(jié)合較大的正面和較小的床層高度,在保持床層體積小的同時(shí)產(chǎn)生了很高的通量。典型的工藝數(shù)據(jù)表明:流通模式下膜吸附器的通量比柱吸附器高兩個(gè)數(shù)量級(jí)。

在流通模式下,傳統(tǒng)的色譜法最好在很高的流速下運(yùn)行。然而,這種高流速只能通過使用直徑很大的生產(chǎn)柱來實(shí)現(xiàn)。為了達(dá)到類似于膜的通量,流通模式下使用的基于樹脂的色譜柱具有較大的床層體積,并且其尺寸絕對(duì)超過用途。

尺寸緊湊

與柱式或超離心式相比,Sartobind?囊式或膜包系統(tǒng)要緊湊得多。此外,它們屬于即用型,因此安裝更加簡單,節(jié)省了手動(dòng)操作時(shí)間并縮短了工廠時(shí)間。

特別是在流通和病毒捕獲應(yīng)用中,色譜柱因外力使得尺寸過大,膜吸附器的優(yōu)勢就體現(xiàn)出來了。與此同時(shí),大型色譜柱硬件的前期投資很大。

此外,膜吸附器是一次性(一次性使用)設(shè)備,這減少了存儲(chǔ)空間和驗(yàn)證成本。

高容量

Sartobind?膜的孔徑大于3μm。這使得大蛋白質(zhì)、生物制品、病毒或病毒樣顆粒進(jìn)入大孔膜結(jié)構(gòu)。因此,與傳統(tǒng)色譜柱相比,Sartobind?膜吸附器對(duì)病毒的結(jié)合能力提高了10倍,精純能力提高了約200倍。

傳統(tǒng)的色譜珠的孔徑小于100nm。小孔會(huì)限制大分子進(jìn)入內(nèi)部結(jié)合位點(diǎn),導(dǎo)致大生物分子、血液因子和病毒或病毒樣顆粒的結(jié)合能力較低。此外,色譜柱運(yùn)行的流速比膜吸附器低10到30倍,允許擴(kuò)散到更小的孔隙。

提高了一次性膜層析的生產(chǎn)力

下載海報(bào)

節(jié)約了緩沖液和時(shí)間

膜層析技術(shù)在單克隆抗體下游工藝中的定位及其在流通精純方式中的優(yōu)勢,對(duì)工藝時(shí)間(-50%)和緩沖液消耗(-75%)有著巨大的影響。雖然在這些應(yīng)用中色譜柱通常是過大,但由于尺寸合適,膜吸附器的COG降低了60%以上。

之所以節(jié)省時(shí)間和緩沖液,是因?yàn)榻Y(jié)合采用了最佳尺寸的膜吸附器以及較高的流速。具有Q樹脂的傳統(tǒng)填充床柱的結(jié)合能力一般為50-70 g/L,如要達(dá)到100-150 cm/hr左右的體積流速,需要較大的直徑。相比之下,Sartobind? Q 膜吸附器的結(jié)合能力約為10 kg/L,典型的流速為450-600 cm/hr。

1Li et al., Amgen, J. BioProcessing, 09/10, 23-30, 2005

層析與過濾一樣容易

膜吸附器是現(xiàn)成和一次性的,可避免包裝、清洗和重新驗(yàn)證。膜吸附器的使用就像使用過濾器一樣簡單。

膜吸附器是現(xiàn)成和一次性的,可避免包裝、清洗和重新驗(yàn)證。膜吸附器的使用就像使用過濾器一樣簡單。

不同形態(tài)有4 mm或8 mm的膜床高度,分別用于精純和粘結(jié)&洗脫應(yīng)用。膜吸附器的擴(kuò)展是很容易的:在保持已選床層高度的同時(shí),囊的大小可以簡單地適應(yīng)工藝的要求。壓力-流量關(guān)系和突破曲線的形狀與較小的囊相同。

流通式集料清除

膜上的大孔結(jié)構(gòu)使得大分子更容進(jìn)入配體。因此,Sartobind? Phenyl有利于集料清除。在流通模式下,建議使用 Sartobind? Phenyl ,其緩沖液耗量相比樹脂減少了75%。

在疏水相互作用色譜中,使用濃度大于480mM的硫酸銨清除集料。通過選擇濃度在230–480 mM之間的硫酸銨,可保留集料,同時(shí)將單體mAb留在流通集料中。1

總的來說,使用膜層析法去除流通集料可以減少COG和加工時(shí)間。
???????1Ebert, S., Fischer-Frühholz, S., Efficient Aggregate, Removal from Impure Pharmaceutical Active Antibodies, BioProcess Int., Vol. 9,(2), 2011, 36-42

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